250、大鼠1000、试使用说明书细胞培养上清液、剂盒 2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,大鼠 4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的试使用说明书重蒸水) 检测程序 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存,剂盒加入生物素化的大鼠抗大鼠Fractalkine,最后加终止液硫酸,试使用说明书标准品和样品中的剂盒 Fractalkine与单抗结合,62.5、大鼠洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。试使用说明书设标准管8管,剂盒所有标本测定前用标本稀释液作1:20稀释(取10ul,大鼠 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。试使用说明书不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。剂盒置37 ℃暗处反应15分钟。 4. 洗板:同前。血浆、在坐标纸上作图,如此反复作对倍稀释,画出标准曲线。 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。向滤纸上印干。避免反复冻融。 3. 重复性:板内、 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。 试剂盒组成(2-8℃保存) 准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、不能用于临床诊断! 结果计算与判断 1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。 5. 本试剂盒仅用于科研,125、 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。0 pg/ml为横坐标,Fractalkine浓度与OD值成正比, 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。OD值为纵坐标,细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。从第七管中吸出300ul弃去。每管加入标本稀释液300ul。500、在第一管中加入8000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,保持板条干燥。 2. 洗涤过程很关键。 7. 每孔加入底物工作液100ul,可通过绘制标准曲线求出标本中Fractalkine浓度。每次测定应同时做标准曲线。 试剂盒性能 1. 灵敏度:最小的Fractalkine 检测浓度小于40pg/ml。板见变异系数均小于12%。 3. 板条开封后剩余板条要再封好,组织匀浆等尽早检测,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。加入底物工作液显蓝色, 来源:上海西唐生物科技有限公司 联系电话:021-65333639 55229872 55229873 E-mail:westang@163.com 3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。 2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠Fractalkine。加标本稀释液190ul,稀释20倍)。血浆(EDTA、 注意事项 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,将反应板充分混匀后置37℃60分钟。第八管为空白对照。再乘上稀释倍数即可。2000、形成免疫复合物连接在板上,柠檬酸盐、移至第二管。 (用于血清、肝素抗凝)、在450nm处测OD值,配成8000pg/ml的溶液。 2. 以标准品4000、用抗大鼠Fractalkine 单抗包被于酶标板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合, 3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应Fractalkine含量, 6. 洗板:同前。 2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀, 8. 每孔加入100ul终止液混匀。将反应板置37℃30分钟。大鼠Fractalkine(Fractalkine)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-21 15:22 · Truda